Серолошки тестови: видови, употреба

Лабораториска дијагноза на речиси сите заразни болести е врз основа на откривање на антитела во крвта на пациентот, кои се произведени од страна на антигенот на патогенот, серолошки методи. Тие влегоа во медицинска пракса во крајот на XIX - почетокот на XX век.

Развојот на науката помогна да се дефинира антигенска структура на микроби и хемиски формули на нивните токсини. Тоа е можно да се создаде не само терапевтски, но исто така, дијагностички серум. Тие се добиваат со администрирање атенуирани патогени лабораториските животни. По неколку дена на жива во крвта зајаци или глувци подготвени производи кои се користат за идентификација на бактерии или нивни токсини користење серолошки тестови.

На извоз за манифестација на оваа реакција зависи од условите на неговото формулирање и состојбата на антигени во крвта на пациентот. Ако микроби се нерастворливи честички, тие се населат, лизираат, имобилизирани или врзани во серумот. Ако се растворливи антигени, се појавува феноменот на неутрализација или врнежи.

аглутинација (PA)

Серолошки тест на аглутинација е многу специфична. Тоа е лесно да се изврши и е сосема јасно за брзо откривање на присуство на антигени во серумот на пациентот. Тоа се користи за поставување на Видал реакција (дијагноза на тифус и паратифус) и Weigl (тифус).

Тоа е врз основа на специфична интеракција помеѓу човечки антитела (или аглутинини) и на микробиолошки клетки (agglyutenogenami). По нивната интеракција се формираат честички кои талог. Ова е позитивен знак. За поставување на реакција може да се користи жив или мртов микробиолошки агенси, габи, протозои, крвни клетки и соматски клетки.

Хемиска реакција е поделена во две фази:

1. Специфични антитела соединението (AT) со антигени (AG).
2. Неспецифични - таложење на конгломерати AG-AT, односно формирање на agglutinate.

Реакција индиректна аглутинација (TPHA)

Оваа реакција е повеќе чувствителни отколку претходниот. Тоа се користи за дијагноза на болести предизвикани од бактерии, интрацелуларни паразити, протозои. Тоа е толку специфичен која може да детектира дури и многу ниски концентрации на антитела.

За неговото формулирање користење прочистена овчо црвените крвни зрнца и црвените крвни клетки на човечкиот pretreated со антитела или антигени (тоа зависи од она лабораторија сака да се најде). Во некои случаи, човечки црвени крвни клетки третирани со имуноглобулини. Серолошки одговор на еритроцитите се смета за валидно ако врнежи од него се случи на дното на цевката. На позитивна реакција може да се каже кога клетките се наредени во форма на превртен чадор, окупаторската целиот дното. Негативните реакции се постигна кога црвените крвни клетки се населат во форма на колона или копчиња во центарот на дното.

реакција врнежи (RP)

Серолошки реакции од овој тип служат за да се идентификуваат исклучително мали честички антигени. Ова може да биде, на пример, протеини (или делови од него), соединенијата со протеини со липиди или јаглехидрати, дел од бактерии и нивните токсини.

Серуми за реакција се добива со вештачки наезда на животните, обично зајаци. Во овој метод, може да добие апсолутно секој преципитирачки серум. Стоп серолошки врнежи сличен механизам на дејство на аглутинација. На антитела содржани во серумот се врзуваат за антигени во колоиден раствор за да се формира голем протеински молекули, кои се депонирани на дното на цевката или на супстратот (гел). Овој метод се смета да биде многу специфични и може да се открие дури и траги на супстанцијата.

Се користи за да се дијагностицира чума, туларемија, антракс, менингитис и други болести. Исто така се вклучени во судското испитување.

тест Гел врнежи

Серолошки тестови може да се врши не само во течен медиум, но во агарозен гел. Ова се нарекува дифузен метод врнежи. Со тоа, студија на составот на комплексни антигенски мешавини. Овој метод е врз основа на хемотакса на антигени на антитела, и обратно. Гелот тие се движат кон едни со други со различна брзина и состанок за формирање врнежи линии. Секоја линија - еден сет на К-AT.

Неутрализација егзотоксин антитоксин (RN)

Antitoxic серум може да се неутрализира егзотоксин кој микроорганизми произведуваат. Врз основа на овие податоци и серолошки тестови. Микробиологија ја користи оваа метода за титрирање на серуми, токсини и токсоиди, како и нивното терапевтско дејство. Силата на неутрализација на токсин се утврдени од страна на конвенционалните единици - АЕ.

Исто така, поради оваа реакција може да се утврди видови или видови кои припаѓаат егзотоксин. Се користи во дијагнозата на тетанус, дифтерија, ботулизам. Студијата може да се врши "на стакло", а во гел.

лиза реакција (RL)

Имунолошкиот серум, кој влегува во телото на пациентот, има, за разлика од нејзината главна функција на пасивен имунитет, дури и литичка својства. Тој е способен за растворање на микробиолошки агенси, клеточни и странски елементи вирусот кои влегуваат во телото на пациентот. Во зависност од специфичноста на антителата кои се вклучени во серумот изолирани bactericidin, cytolysins, spirohetoliziny, hemolysins и други.

Овие специфични антитела се нарекуваат "дополнување". Таа се наоѓа во речиси сите телесни течности, има комплекс структура на протеини и е многу чувствителна на зголемување на температурата, потресена, киселини и директна сончева светлина. Но, во суви државата е во состојба да се задржи нивната литичка својства и до шест месеци.

Постојат некои видови на серолошки тестови од овој тип:

- bacteriolysis;

- хемолиза.

Bacteriolysis се врши со помош крвниот серум на пациентот и специфични имунолошки серум со живи бактерии. Значи, ако истражувачот гледа на лиза на бактерии, и одговорот ќе се смета за доволен број на позитивни комплементот е присутен во крвта.

Вториот одговор на крвта серолошки е тоа што суспензијата на еритроцитите се третира пациентот серум содржи hemolysins, кои се активираат само во присуство на одредена комплимент. Ако има еден, а потоа лабораторија гледање на распаѓањето на црвените крвни клетки. Оваа реакција е широко се користат во модерната медицина да се утврди на титарот на комплементот (на пример, најмалата количина провоцира лиза на црвените крвни клетки) во крвниот серум и за производство на анализа за врзување на комплементот. Тоа беше во овој начин изведовме серолошка реакција за сифилис - Wasserman.

фиксација на комплемент (РСК)

Оваа реакција се користи за откривање на серумски антитела на пациентот на инфективен агенс, како и да се идентификува основоположник на својата антигенски структура.

До овој момент што ги опишавме едноставен серолошки тестови. RAC смета тешко реакција, бидејќи тоа комуницираат, не два, туку три елементи: антитело, антиген и се надополнуваат. Нејзината суштина лежи во фактот дека интеракцијата помеѓу антителото и антигенот се случува само во присуство на протеини комплимент кои се adsorbed на површината на формираната комплекс К-AT.

Самите антигени по додавање на комплементот, предмет на значителни промени, кои укажуваат на квалитетот на реакција. Ова може да биде лиза, хемолиза, имобилизација, бактерицидно или бактериостатски ефект.

Самата хемиска реакција се одвива во две фази:

1. Формирање на антитело-антиген, што не е визуелно забележлива истражувач.
2. Менување на антиген под дејство на комплементот. Оваа фаза обично може да се следи со голо око. Ако визуелен одговор не е видлива, а потоа користете дополнителен индикатор систем кој ви овозможува да се открие промени.

индикатор систем

Оваа реакција се базира на врзување на комплемент. час на епрувети по поставувањето РСК додаде прочистена овчи еритроцити и серум хемолитична не содржи додаток. Ако цевка остана неврзан дополнување, ќе им се придружи на комплексот N-AT формиран помеѓу овци крвни клетки и hemolysin, и да предизвика нивното раскинување. Ова би значело дека DGC е негативен. Ако црвени крвни клетки останаа непроменети, а потоа, според тоа, реакцијата е позитивна.

hemagglutination (RHA)

Постојат две фундаментално различни hemagglutination. Еден од нив - серолошки, тој се користи за одредување на крвни групи. Во овој случај еритроцити комуницирате со антитела.

И втората реакција не е поврзана со серолошки, со оглед на црвени крвни клетки реагираат со хемаглутинин произведени од вируси. Од секоја exciter делува само на одредени еритроцитите (пилешко месо, овци, мајмун), ние може да се претпостави оваа реакција малку специфични.

Отстрани позитивен или негативен одговор, тоа е можно за локацијата на крвните клетки во дното на цевката. Ако тие фигура личи на превртен чадор, потоа саканиот вирусот е присутен во крвта на пациентот. И ако сите црвени крвни клетки формирана како монета колони, не постојат непознати патогени.

Реакција на инхибиција hemagglutination (HAI)

Ова високо специфична реакција, што овозможува да се воспостави форма, тип на вирус или присуство на специфични антитела во серумот на крвта на пациентот.

Нејзината суштина лежи во фактот дека антителата додадена на цевка содржи материјалот за испитување, спречува таложење на антигени на еритроцитите, со што се запира hemagglutination. Оваа е квалитативен индикација за присуство на специфични антигени во крвта на одредена саканиот вирусот.

Реакција имунофлуоресценција (RIF)

Реакцијата е врз основа на способноста за да се идентификуваат комплекси со AT-AH флуоресцентни микроскопија по третманот flyuorohromnymi бои. Овој метод е едноставен за користење, не бара изолација на чиста култура и ги зема малку време. Тоа е неопходно за брза дијагноза на заразни болести.

Во пракса, овие серолошки тестови се поделени во две категории: директен и индиректен.

Директен RIF произведени антигенот кој претходно обработени флуоресцентни серум. И индиректни е дека лекот е прв пат се третира со конвенционална diagnosticum содржи антитела до посакуваната антиген, а потоа повторно се применува флуоресцентни сурутка, кој е специфичен за протеините на комплекс К-AT, и микробиолошки клетки да станат видливи од страна на микроскопија.